源葉組織細(xì)胞消化液

胰蛋白酶

       組織細(xì)胞培養(yǎng)泛指從動物活體體內(nèi)取出組織，在模擬體內(nèi)生理環(huán)境等特定的體外條件下，進(jìn)行孵育培養(yǎng)，使之生存并增值。

  細(xì)胞或組織培養(yǎng)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域，是細(xì)胞與組織研究的重要技術(shù)手段。

  組織細(xì)胞培養(yǎng)最初是用未離散的組織小塊作為對象，組織的生長僅僅局限于從組織中遷移出的細(xì)胞。1916年，Rous和Jonee首次使用胰蛋白酶將離體細(xì)胞分散開來。1952年，Dullbecco等采用胰蛋白酶消化法獲取了單個細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。此后，胰蛋白酶在細(xì)胞傳代中得到了廣泛的應(yīng)用。

  胰蛋白酶是從動物胰臟中分離得到的一種水解酶，特異性很強。功能主要是水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，使貼壁生長的細(xì)胞分散成單個細(xì)胞。胰蛋白酶的消化能力主要和細(xì)胞的種類和特性、濃度、溫度和作用時間有關(guān)。配制消化液時，應(yīng)注意濃度不能過高，消化能力太強，損壞細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞的貼壁率低，也應(yīng)使用不含Ca+、Mg+和血清的緩沖液，以免這些存在降低胰蛋白酶的消化能力。胰蛋白酶原料常用1:250的，濃度一般為0.1%~0.5%，最常用0.25%。

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